jueves, 4 de abril de 2019

B) Metodo de Biuret

  • Descripción del Método de Biuret 

Es una proteína, péptidos cortos y otros compuestos con dos o mas enlaces peptídicos en sustancias de composición desconocida. Esta hecho de hidróxido potásico (koh) y sulfato cúprico (CuSO4), junto con tartrato de sodio y potasio (KNaC4O64H2O). El reactivo, cambia a violeta en presencia de proteínas, y vira a rosa cuando se combina con poli péptidos de cadena corta. El hidróxido de potasio no participa en la reacción, pero proporciona el medio alcalino necesario para que tenga lugar.








  • Propósito de Método Biuret 
Metodo de Biuret objetivo: Manejarse en el laboratorio el metodo de biuret para determinar proteínas observar y determinar experimentalmente el efecto de pH sobre las proteínas de la leche.  

Es un metodo más  rápido y menos engorroso que el de Lowry. La reacción debe su nombre al Biuret, una molécula formada a partir de dos de urea (H2N-CO-NH-CONH2), que es la más senclla que da positiva la reacción. Bajo condiciones alcalinas, sustancias conteniendo dos o más uniones peptídicas forman un complejo púrpura con sales de cobre, al igual que en la primera etapa del metodo de Lowry .


  • Etapas de Aplicación 
La determinación de las   proteínas totales en el liquido cefalorraquídeo (LCR), forma parte de los estudios boquinos realizados a este material clínico, y junto con el análisis de glucosa en el liquido, constituye un parámetro importante para la diferenciación   de trastornos neurológicos o patológicos relacionadas.

  • Alcances y limitaciones 
Son varios factores muy importantes en la separación de sustancias por cromatógrafo en papel dentro ellos hay que citar la partición, la absorción y en algunos casos, el intercambio ionico.

  • Características de limites del biuret 
Términos generalmente aplicado a los amino-alcano-ácidos, su formula general es H3N +- (CR1R2)n-COO- si n= 1 obtengo la serie alfa, si es igual a 2, la beta, etc. 
En general se puede aplicar a sustancias   que tengan aminos y ácidos (aproximadamente 700 en organismos)

  • Factibilidad del Biuret
La reaccion o prueba de Biuret es un metodo que detecta la presencia de compuestos con dos o m´s enlaces peptídicos y, por tanto, sirve para todas las proteínas y péptidos cortos. El reactivo del Biuret (sulfato de cobre en una base fuerte) reacciona con los enlaces del péptido y cambia el color cuando entra en contacto con otra sustancia.


  • Características de la Factibilidad 
La producen los péptidos y las proteínas, pero no los aminoácidos, ya que se debe a la presencia del enlace peptídico (-CO-NH-) que se destruye al liberarse los aminoácidos.   Cuando una proteína se pone en contacto con un álcali concentrado, se forma una sustancia compleja denominada Biuret. Debido a dicha reacción fue que observamos que el agregar el reactivo  de sulfato de cobre más solución de proteína precipito una coloración violeta. Quedando en el fondo el tubo una tonalidad azul cuelo reacción positiva. Precipitando a una coloración amarilla la reacción nos torna negativa al no haber presencia de proteínas.


  • Sugerencias de Aplicación 
Efectos del Biuret en las plantas el Biuret es un compuesto que resulta toxico para las plantas en concentraciones elevadas, ya sea mediante su aplicación foliar o vía suelo. Aplicar área como elevadas concentraciones de Biuret cerca de las semillas causa toxicidad durante la germinación de las plantas, aunque también es cierto grado la toxicidad puede deberse a la liberación de NH3, proveniente de la hidrolisis de la Urea.


  • Medidas de Seguridad e Higiene 
Equipo de protección individual Úsese indumentaria protectora adecuada. para la manipulación de productos químicos solo se puede utilizar rpa de protección identificada con el marcado CE y el codigo de cuatro dígitos relacionado. Protección de ojos y cara Gafas con protección lateral DIN/En- normas: DIN EN 166 Recomendación: VWR 111-0432 PROTECCION DE PIEL para la manipulación de productos químicos solo se pueden utilizar guantes de protección identificación con el marcado CE y el codigo de cuatro dígitos relacionados 

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